wb分离胶的选择原理?
2021-06-30
根据目的蛋白的分子量大小选择不同浓度的分离胶,8%、12%和15%三种浓度的分离胶就完全可以搞定日常蛋白的测定。
一般测定100kDa分子量以上的蛋白可选择8%浓度的分离胶;测定20kDa分子量以下的蛋白可选择15%浓度的分离胶,中间的分子量可选用12%浓度的分离胶。
有的时候蛋白跑不出来,其实未必是分离胶浓度选的不好,也有可能是marker的问题。marker起到的是蛋白分子量指示剂作用,但是要根据蛋白分子量选择合适的marker。
一般的marker分子量范围在10-130kDa之间,都可以满足正常蛋白的需要。
但有些分子量范围较广的marker,比如说6-250kDa,虽然说它范围很广,可中间的蛋白分子量并没有区分的很细,只适用于大分子或小分子蛋白,而对于30-70 kDa的蛋白并不是很适用。
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