引物越长为什么退火温度越高?
2021-05-23

退火温度是影响PCR反应特异性的重要因素。

引物与模板复性所需要的退火温度取决于引物的长度、碱基组成及其浓度。引物长度越短,引物中G+C的含量越低,所需的退火温度越低。

虽然降低退火温度可能增加扩增产量,但引物与模板间的错配现象也会增多,导致非特异性扩增上升。

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