一种理想标记物应具备哪些特性?
2021-05-27
一种理想的标记物,应具备以下几种特性:
①高度灵敏性;
②标记物与核酸探针分子的结合,应绝对不能影响其碱基配对特异性;
③应不影响探针分子的主要理化特性,特别是杂交特异性和杂交稳定性,杂交体的解链温度(Tm)应无较大的改变;
④当用酶促方法进行标记时,应对酶促活性Km值无较大的影响以保证标记反应的效率和标记产物的比活性,当标记探针还继续作为下一步酶促反应的底物(如用于DNA序列测定)时,应不能影响此步骤的酶活性;
⑤检测方法除要求高度灵敏性外,还应具有高度特异性,尽量减低假阳性率。如果要求更严一些,它还应具有较高的化学稳定性,保存时间较长,标记及检测方法简单;
对环境无污染,对人体无损伤;价格低廉等。
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