毕氏酵母菌株有哪些?
2021-07-18
毕赤酵母常用的菌株类
(1) Mut+和Mut s
在毕赤酵母基因组中有2个醇氧化物酶编码基因,即AOX 1基因和AOX2基因。菌株利用甲醇的速度主要是依靠AOX 1基因表达的AOX 1蛋白,其醇氧化物酶的活性非常高以至于在有AOX 1酶蛋白存在的情况下可以忽略AOX2酶蛋白,这就是甲醇营养型毕赤酵母的两种表型Mut+和Mut s产生的原理。
当菌株基因组中既有AOX 1基因,也有AOX2基因时,菌株的表型为Mut+该菌株有甲醇的培养基中仍可以正常生长。
当菌株基因组中仅有AOX2基因时,菌株的表型为Mut s,该菌株在有甲醇的培养基中生长缓慢。
(2)菌株GS115、KM71和SMD1168的区别
GS115、KM71和SMD1168等是用于表达外源蛋白的酵母受体菌。GS115、KM71、SMD1168是组氨酸缺陷型,如果表达载体上携带有组氨酸基因,可补偿宿主菌的组氨酸缺陷,因此可以在不含组氨酸的培养基上筛选转化子。
这些受体菌自发突变为组氨酸野生型的概率一般低于10-8。 G S 115表型为Mut+ 。重组表达载体转化G S 115后,长出的转化子可能是Mut+,也可能是Mut s,可以在MM和MD培养基上鉴定表型。
SMD1168和GS115类似,但SMD1168是蛋白酶缺陷型,可降低蛋白酶对外源蛋白的降解作用。KM71没有AOX 1基因,本身就是Mut s。
因此转化后所有的转化子都是Mut s,不必鉴定表型。
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