连接t载体转化注意事项?
2021-05-01

PCR产物纯化后测定DNA的浓度,按照适当的比例与T-Vector在含有连接酶的buffer中4°过夜或37°3小时连接,然后连接产物涂筛选平板(ALB)筛选即可。

要确保产物末端有A尾,如果是高保真酶扩增的产物需先加A尾,纯化后再连接;再就是载体和产物的比例要合适。

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