1. 使用前将试剂盒和样品处理物提前从冰箱中拿出来使其达到室温。装有洗液的洗瓶。

2．从铝箔袋中拿出要求数量的微孔条，放入干燥剂并重新封好袋子以免微孔条受潮。

3. 用移液器吸取75 μl 样品处理物到对应的测试孔 ，同时在每个孔中都加入75 μl 抗体溶液。

4. 轻轻震动30秒使其混匀孵育30分。

5. 孵育完成后，将微孔中的溶液倒入水槽中，用配好的洗板缓冲液清洗微孔。每孔每次至少加入250ul，微震荡洗涤后倒掉，重复三次，总共四次洗板。

拍板，去掉残留的洗液。

6. 每个孔加入150 μL 酶标结合物.

7. 轻轻震动30秒使其混匀孵育30分

8. 孵育完成后，将微孔中的溶液倒入水槽中，用配好的洗板缓冲液清洗微孔。每孔每次至少加入250ul，微震荡洗涤后倒掉，重复三次，总共四次洗板。

拍板，去掉残留的洗液。

9. 每个孔加入150 μL 底物.孵育30分

10. 每孔加入 100 μL 终止液.

11. 450nm 下读取每个孔的吸光度值（OD）